猪瘟病毒表面抗原E2基因的克隆与原核表达

• 作者: 吴思敏 唐亚兰 朱传刚 李嘉静 李浩 林矫矫 江嘉欣 洪炀 王钊哲 石耀军 许瑞 陆珂 陈兆国
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪瘟病毒 E2基因 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 病毒
• 页码范围: 32-36
• 页数: 5页
• 分类号: S852.651
• 字数: 3569字
• 语种: 中文

摘要

为获得可用于诊断的猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)E2蛋白重组抗原,对CSFV-E2的多个B细胞抗原表位进行重构和表达.将人工合成的E2蛋白多抗原表位基因与pET-28a(+)载体连接后,转化至宿主菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析蛋白可溶性,His亲和层析柱纯化蛋白并进行抗原性检测.重构后的猪瘟病毒E2基因多抗原表位基因大小约500 bp,PCR、双酶切鉴定结果显示与预期相符;重组蛋白为可溶性表达,大小约23 kDa;Western blot结果显示,重组蛋白可与猪瘟阳性血清发生特异性结合,具有良好的免疫反应性,可作为诊断抗原用于猪瘟病毒感染动物的血清抗体检测.