基于16SrDNA基因的谷斑皮蠹PCR检测技术

• 作者: 张小菊 张祥林 李亚伟 李京 王翀 罗明
• 来源期刊: 生物安全学报
• 关键词: 谷斑皮蠹 16SrDNA 常规PCR 实时荧光PCR
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 75-79
• 页数: 5页
• 字数: 3196字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1787.2017.01.012

摘要

[目的]谷斑皮蠹是一种重要的检疫性害虫,在新疆周边多个国家分布,口岸检疫人员多次从进境货物中截获谷斑皮蠹,该虫对新疆的农业生产极具威胁.[方法]以谷斑皮蠹的16S rDNA基因为靶序列,用昆虫通用引物对4种供试皮蠹进行PCR扩增,将扩增产物进行克隆和测序,用生物软件设计检测谷斑皮蠹的特异性引物与探针.[结果]设计的特异性引物(TG-SNP-F/TG-SNP-R)及所建立的常规PCR方法能有效检测出谷斑皮蠹,其扩增产物的片段大小为250 bp,灵敏度为3 ng·μL-1.设计的特异性引物(TG-F/TG-R)和探针(TG-probe),以及所建立的实时荧光PCR方法,对谷斑皮蠹的检测特异性强,灵敏度达0.8 fg·μL-1.[结论]建立的常规PCR方法和实时荧光PCR检测方法能够对谷斑皮蠹进行准确鉴定,为口岸检疫人员检测进境货物中携带的谷斑皮蠹提供技术支持.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗明	新疆农业大学农学院	83	1376	23.0	35.0
2	张祥林		65	571	13.0	21.0
3	王翀		28	109	6.0	9.0
4	李京		4	2	1.0	1.0
8	李亚伟		13	17	2.0	3.0
9	张小菊		7	3	1.0	1.0