玉米淀粉合成酶SSⅡa启动子的克隆及功能分析

• 作者: 刘相国 崔喜艳 王晓梅 王阔 陈展宇
• 来源期刊: 华南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 玉米 淀粉合成酶 SSⅡa启动子 克隆 载体构建 功能分析
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 页码范围: 15-22
• 页数: 8页
• 分类号: S513
• 字数: 5128字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2017.01.004

摘要

【目的】克隆玉米Zea mays淀粉合成酶SSⅡa启动子,并分析其功能,为进一步研究和应用SSⅡa启动子奠定基础。【方法】通过NCBI上公布的玉米基因组序列,在网站MaizeGDB上BLAST查找到SSⅡa 5′侧翼序列,利用PCR方法从玉米B73中克隆SSⅡa启动子；通过PlantCare在线分析启动子顺式作用元件,用特异性引物分别克隆出长度为1407、867、633、483和365 bp的片段,与植物表达载体pCAMBIA3301连接,构建5种5′缺失体的植物表达载体,命名为P1、P2、P3、P4和P5。用农杆菌介导法转化拟南芥Arabidopsis thaliana,获得转基因拟南芥。【结果】以玉米B73基因组DNA为模板,用特异性引物SSⅡaF/SSⅡaR进行扩增,得到2526 bp序列；除草剂筛选的阳性拟南芥植株PCR验证均检测出gus基因；GUS组织化学分析表明,5种类型启动子构建的表达载体在成熟期叶片、果荚中均显蓝色；gus基因定量分析表明,成熟期5种转基因拟南芥叶片中, gus基因表达量P1最高,其他基本一致；种子中gus基因表达量P1和P2相近,且高于P3、P4和P5。【结论】成功克隆玉米SSⅡa启动子；构建的5种SSⅡa启动子缺失体表达载体在转基因拟南芥中均具有活性,长度为1407 bp(P1)和867 bp(P2)的启动子具有胚乳特异性。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王晓梅	吉林农业大学农学院	25	98	5.0	9.0
2	陈展宇	吉林农业大学农学院	63	926	17.0	28.0
3	崔喜艳	吉林农业大学生命科学学院	62	454	14.0	18.0
4	刘相国		14	56	5.0	7.0
5	王阔	吉林农业大学生命科学学院	4	15	2.0	3.0