运用酵母双杂交系统筛选与埃博拉病毒GP、VP30、NP、L蛋白存在相互作用的宿主蛋白

• 作者: 张部昌 曹诚 李成功 高婷
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: 埃博拉病毒 酵母双杂交技术 COMMD1 APOA2
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 249-255
• 页数: 7页
• 分类号: R373.32
• 字数: 7010字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2017.04.001

摘要

目的 运用酵母双杂交技术从人肝cDNA文库中筛选出与埃博拉病毒(EBOV)GP、VP30、NP、L蛋白存在相互作用的宿主蛋白,用于研究GP、VP30、NP、L蛋白在EBOV传染病中的生物学功能.方法 利用重组PCR技术构建诱饵质粒pGBKT7-GP、pGBKT7-VP30、pGBKT7-NP、pGBKT7-L,将诱饵菌株与人肝cDNA文库菌株进行杂交筛选,对筛选到的阳性克隆进行DNA测序和生物信息学分析,然后再利用酵母回复性实验进一步验证,排除假阳性结果.结果 成功构建了诱饵质粒pGBKT7-GP、pGBKT7-VP30、pGBKT7-NP、pGBKT7-L,筛选出6个可能与GP、VP30、NP、L蛋白有相互作用的宿主蛋白,分别是COMMD1、ALB、PSMD8、APOA2、CYP2E1、HP.酵母回复性实验进一步说明了COMMD1和APOA2与NP蛋白可能存在相互作用.结论 酵母双杂交筛选出多个可能与EBOV的GP、VP30、NP、L蛋白存在相互作用的捕获蛋白,为研究EBOV的致病机制提供了参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹诚	军事医学科学院生物工程研究所	112	536	10.0	19.0
2	张部昌	安徽大学健康科学研究院	82	550	12.0	20.0
3	高婷	军事医学科学院生物工程研究所	7	10	2.0	3.0
4	李成功	安徽大学健康科学研究院	1	0	0.0	0.0