东方粘虫中肠V-ATP酶A亚基突变体TSCA的原核表达及复性纯化

• 作者: 侯文思 李玉洁 王媛媛 陶虎
• 来源期刊: 西北农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: V-ATP酶A亚基 定点突变 原核表达 包涵体复性
• 年，卷（期）: 2017,（8）
• 页码范围: 1248-1252
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 4377字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7606/j.issn.1004-1389.2017.08.019

摘要

根据得到的东方粘虫[Mythimna separate(Walker)]中肠V-ATPase A亚基(VHA-A)基因(VATPA),预测其三维结构,构建定点突变并复性.利用Swiss-Model在线预测VHA-A三维结构,确定突变位点,通过重折叠PCR(Overlap-PCR)技术构建突变基因并将其整合到pET-22b(+)载体上,得到重组质粒pET-22b(+)-TSCA,转入大肠杆菌BL21中表达,最后通过亲和层析纯化包涵体蛋白质并进行透析复性.结果表明,成功构建突变基因和融合表达载体,融合蛋白质以包涵体形式表达,并得到大量纯化的可溶性蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	侯文思	西北农林科技大学理学院	4	0	0.0	0.0
2	李玉洁	西北农林科技大学理学院	1	0	0.0	0.0
3	王媛媛	西北农林科技大学生命科学学院	13	22	3.0	4.0
4	陶虎	西北农林科技大学理学院	15	5	1.0	1.0