H2S抑制高浓度ATP诱导的SH-SY5Y细胞凋亡与P2X7受体的相关性研究

• 作者: 卢娜 李东亮 李新娟 李璐 李超堃 杨坤丽 王国红 王娇娇 赵红岗 魏林郁
• 来源期刊: 神经解剖学杂志
• 关键词: 硫化氢 ATP 凋亡 P2X7受体 神经系统疾病
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 原著
• 页码范围: 123-130
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.16557/j.cnki.1000-7547.2017.02.003

摘要

目的:研究H2S对高浓度ATP诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用和可能的机制.方法:人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞、HEK 293和HEK 293-hP2X7R细胞,分为对照组,NaHS组,KN-62组,ATP组,ATP+ NaHS组和ATP+ KN-62组.倒置显微镜观察细胞形态变化,CCK-8法检测细胞活力,Hoechst 33258核染色分析细胞凋亡,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western Blot和RT-PCR法分别检测Caspase-3、Bcl-2在蛋白和mRNA水平的表达.结果:与对照组比较,6 mmoL/L ATP处理3h后SH-SY5Y细胞损伤明显,活力降低至62.7％±3.8％(P＜0.01),而凋亡率升高至30.75％±5.1％ (P ＜0.01).与ATP组比较,用200μmol/L NaHS和500 nmol/L KN-62预处理30 min,SH-SY5Y细胞活力分别升高至90.1％±3.8％和84.6％±3.1％(P＜0.05),凋亡率则分别降低至14.73％±3.4％和18.32％±3.1％(P＜0.01).ATP组SH-SY5Y细胞内Caspase-3表达上调,Bcl-2表达下调,但NaHS和KN-62可抑制Caspase-3表达,促进Bcl-2表达.与对照组和HEK293细胞比较,用2 mmol/L ATP分别处理HEK 293、HEK 293-hP2X7R细胞3h,可见HEK 293-hP2X7R细胞内Caspase-3表达上调(P＜0.01).与ATP组比较,200 μmol/L NaHS预处理30 min,HEK 293-hP2X7R细胞内Caspase-3表达明显下调(P＜0.01).HEK 293细胞Caspase-3表达在各组无差异(P＞0.05).结论:H2S对高浓度ATP诱导的SH-SY5Y细胞凋亡具有抑制作用,且呈浓度依赖性,其作用机制可能与P2X7R相关.