以CotC为分子载体在枯草芽孢杆菌表面展示海藻糖合酶

• 作者: 汪俊卿 王瑞明 王腾飞 赵一瑾
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 海藻糖 海藻糖合酶 枯草芽孢杆菌 表面展示 重组表达
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 71-80
• 分类号: Q814.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.13523/j.cb.20170111

摘要

海藻糖是自然界中普遍存在的一种非还原性双糖,是一种极好的天然干燥剂和保鲜剂.海藻糖合酶能够催化α,α-1,4-糖苷键连接的麦芽糖直接转化为α,α-1,1-糖苷键连接的海藻糖,是生产海藻糖的首选.为获得具有良好展示效果的海藻糖合酶,将其高效稳定的展示于枯草芽孢杆菌芽孢表面,实验同时分别选取增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和海藻糖合酶(Tres)作为模型蛋白,以来自枯草芽孢杆菌的芽孢衣壳蛋白CotC作为枯草芽杆菌表面展示的锚定蛋白进行表面展示研究.利用流式细胞仪分析EGFP在芽孢表面展示的情况,结果表明芽孢衣壳蛋白CotC可以将EGFP固定在芽孢的表面.然后将荧光蛋白基因egfp通过酶切替换为海藻糖合酶基因tres,将重组菌株使用pH7.5的缓冲液清洗并重悬,与底物浓度为30％的麦芽糖在50℃水浴条件下作用2h,反应产物利用HPLC检测,能够检测到海藻糖峰,通过计算得到的酶活为252U/ml.说明海藻糖合酶基因通过与芽孢衣壳蛋白CotC融合后可被展示在芽孢的表面.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王瑞明	齐鲁工业大学生物工程学院	33	84	5.0	6.0
3	王腾飞	齐鲁工业大学生物工程学院	19	55	5.0	5.0
5	汪俊卿	齐鲁工业大学生物工程学院	11	27	3.0	3.0
11	赵一瑾	齐鲁工业大学生物工程学院	2	5	2.0	2.0