肉制品中沙门菌实时荧光定量聚合酶链反应标准质粒的构建

• 作者: 张红芝 於颖 陈敏 顾其芳
• 来源期刊: 上海预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 质粒标准品 荧光定量聚合酶链反应 沙门菌 肉制品
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 健康危害因素监测与控制
• 页码范围: 273-276,280
• 页数: 5页
• 分类号: R378.2+2
• 字数: 3215字
• 语种: 中文

摘要

目的 制备用于检测肉制品中沙门菌实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)的标准质粒.方法 设计针对沙门菌invA基因的引物,扩增特异片段,转入质粒载体中构建重组质粒.将构建的重组质粒作为标准品,进行优化后的实时荧光定量PCR,建立标准曲线,并考察该标准品灵敏性及稳定性.结果 成功构建含有沙门菌invA基因的质粒标准品,用其建立的标准曲线循环阈值(Ct值)与模板的拷贝数呈良好线性关系(r2=0.9979),最低可以检出10 拷贝/反应.该标准质粒经验证具有良好的稳定性.用该质粒标准品检测肉制品中的沙门菌,经2 h增菌后,可在7 h内完成对样品的检测.结论 所构建的质粒标准品可用于荧光定量PCR检测肉制品中的沙门菌,为考量实验质量提供参考依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈敏		92	691	15.0	20.0
2	顾其芳		25	249	9.0	15.0
3	於颖		4	16	2.0	4.0
4	张红芝		8	41	4.0	6.0