小鼠腺病毒荧光定量PCR方法的建立及初步应用

• 作者: 吕宇 周莎桑 宋晓明 应华忠 戴方伟 杜江涛 萨晓婴 褚晓峰
• 来源期刊: 实验动物科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 小鼠腺病毒 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 49-54,65
• 页数: 7页
• 分类号: Q95-33
• 字数: 4421字
• 语种: 中文

摘要

目的 基于TaqMan建立小鼠腺病毒(MAdV)特异的荧光定量PCR检测方法,用于调查长爪沙鼠和小鼠等实验动物中MAdV感染情况.方法 从NCBI下载小鼠腺病毒(MAdV-A和MAdV-3)基因组序列,比对分析后选择保守性较好的基因设计引物和探针.筛选最佳引物对和探针,对其特异性、敏感性、重复性和稳定性进行验证,运用所建立的方法对长爪沙鼠和野鼠的共41份样本进行检测.结果 经特异性和灵敏度鉴定,在设计的3对引物探针中确定一对最佳引物探针MAD-3,可区分小鼠腺病毒与猴腺病毒、禽腺病毒和树鼩腺病毒等24种病原,MAdV质粒DNA最低检测限为4.5 copies/reaction;MAdV纯病毒液和病毒/组织模拟样本的最低检测限均为440 copies/reaction.结论 建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法特异、灵敏和稳定,可用于大鼠、小鼠、长爪沙鼠等实验动物及鼠源性生物制品MAdV的检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕宇	浙江省医学科学院实验动物中心	7	24	4.0	4.0
2	萨晓婴	浙江省医学科学院实验动物中心	55	345	11.0	15.0
3	戴方伟	浙江省医学科学院实验动物中心	29	87	5.0	7.0
4	应华忠	浙江省医学科学院实验动物中心	21	46	4.0	4.0
5	杜江涛	浙江省医学科学院实验动物中心	8	9	2.0	2.0
6	周莎桑	浙江省医学科学院实验动物中心	15	68	4.0	7.0
7	宋晓明	杭州师范大学实验动物中心	6	10	2.0	3.0
8	褚晓峰	浙江省医学科学院实验动物中心	3	4	1.0	2.0