多重竞争性荧光PCR检测X连锁Alport综合征大片段缺失突变

• 作者: 丁洁 俞礼霞 张琰琴 王芳
• 来源期刊: 北京大学学报医学版
• 关键词: Alport综合征,X连锁 大片段缺失突变 COL4A5基因 多重竞争性荧光聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 760-767
• 页数: 8页
• 分类号: R729
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-167X.2017.05.004

摘要

目的:探讨多重竞争性荧光PCR在X连锁Alport综合征分子诊断中的应用.方法:选择20例在北京大学第一医院确诊且未进行基因诊断的X连锁Alport综合征患者为研究对象,同时选择2例经多重连接依赖性探针扩增技术检测到COL4A5基因大片段缺失突变的患者作为阳性对照和1例经肾活检组织电子显微镜检查证实非Alport综合征的男性作为正常对照.首先应用多重竞争性荧光PCR技术扩增COL4A5基因53个外显子和4个参照基因,对于检测到COL4A5基因缺失第1外显子者,进而应用相同技术扩增COL4A5基因外显子1～4、COL4A6基因外显子1～4、两基因共用启动子以及3个参照基因;对于检测到拷贝数缺失者,应用琼脂糖凝胶电泳鉴定扩增后的PCR产物或直接测序.结果:两例阳性对照应用多重竞争性荧光PCR技术检测到的COL4A5基因缺失突变与应用多重连接依赖性探针扩增技术检测到的COL4A5基因缺失突变一致.20例患者中6例(30％)明确了基因型,其中2例患者具有累及COL4A5和COL4A6两个基因5'端的大片段缺失,2例患者具有累及COL4A5基因30个外显子以上的大片段缺失,1例患者具有累及COL4A5基因至少1个外显子的大片段缺失,1例患者具有COL4A5基因缺失13个碱基的小的缺失突变,未检测到重复突变.结论:多重竞争性荧光PCR技术可用于检测X连锁Alport综合征大片段缺失突变,是对该病分子诊断检测方法的重要补充.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	丁洁	北京大学第一医院儿科	243	1699	19.0	28.0
2	王芳	北京大学第一医院儿科	189	1591	15.0	35.0
3	张琰琴	北京大学第一医院儿科	18	56	5.0	7.0
4	俞礼霞	北京大学第一医院儿科	16	102	7.0	9.0