鸭梨PbChiⅡ的克隆与表达分析

• 作者: 乔莉娟 叶嘉 吴运东 张玉星 李丹花 李朋朋 董金皋
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 鸭梨 几丁质酶基因 原核表达 非生物胁迫 表达模式
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 页码范围: 45-51
• 页数: 7页
• 分类号: Q78
• 字数: 4676字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.2017.05.008

摘要

为明确几丁质酶在鸭梨抗病过程中的作用,以鸭梨为试材,提取总RNA,采用RT-PCR方法克隆几丁质酶基因PbChiⅡ,分析PbChiⅡ在梨黑星病菌诱导下的表达模式,构建原核表达载体pET30a-PbChiⅡ,在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中表达PbChiⅡ蛋白,分析重组蛋白在非生物胁迫下的生长能力.结果表明:PbChiⅡ基因全长(基因登录号:KP876485)969 bp,实时定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)分析显示,PbChiⅡ基因的表达受病原菌的调控,在供试的96 h内,梨黑星病菌可诱导该基因表达,且表达量在48 h达到最高.将PbChiⅡ基因成功克隆到原核表达载体pET30a上,SDS-PAGE分析表明,该重组蛋白在37℃,1.0 mmol/L IPTG诱导2 h,表达量最大.转pET30a-PbChiⅡ载体的大肠杆菌BL21(DE3)菌株表达了分子量约35.53 kDa的重组蛋白.诱导的蛋白可增强菌体在NaCl、CuCl2、CdCl2和ZnSO4等非生物胁迫下的生长能力.为进一步探索PbChiⅡ基因的功能提供了基础资料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董金皋		210	2521	27.0	39.0
2	张玉星		105	1012	18.0	26.0
3	叶嘉	邯郸学院生命科学与工程学院	74	259	8.0	11.0
4	李丹花	邯郸学院生命科学与工程学院	14	13	2.0	3.0
5	乔莉娟	邯郸学院生命科学与工程学院	17	26	3.0	4.0
6	吴运东	邯郸学院生命科学与工程学院	9	3	1.0	1.0
7	李朋朋	邯郸学院生命科学与工程学院	3	1	1.0	1.0