鸭梨几丁质酶Ⅲ基因(PbChiⅢ)的克隆及原核表达

• 作者: 张玉星 彭建营 李朋朋 董金皋 许建锋
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 鸭梨 几丁质酶Ⅲ基因(ChiⅢ) 表达模式 原核表达
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 1301-1309
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2015.10.005

摘要

几丁质酶(chitinase,Chi)可以降解病原物真菌细胞壁组分,是一类重要的病程相关蛋白,水杨酸(salicylic acid,SA)、乙烯、植物病原真菌、细菌、病毒等均可诱导其产生.为探究鸭梨(Pyrus bretschneideri Yali)Chi基因的作用,本研究从鸭梨中克隆了几丁质酶Ⅲ(chitinaseⅢ,ChiⅢ)基因的CDS序列,命名为PbChiⅢ(GenBank登录号:KJ872675),全长897 bp.系统进化分析表明,该基因与黄冠梨(Pyrus Huangguan) ChiⅢ基因(ACM45715.1)的氨基酸同源性最高,其核苷酸序列与黄冠梨(FJ589785.1)的亲缘关系最近.实时定量PCR(quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)分析显示,PbChiⅢ基因在鸭梨的根和果实中表达量较大,极显著高于茎和叶中的表达量(P＜0.01);PbChiⅢ的表达受SA的调控,在供试的96h内,SA可诱导该基因表达,且表达量在12h达到最高,与同期对照相比差异极显著(P＜0.01).利用原核表达系统成功表达了PbChiⅢ蛋白,在大约31kD处成功诱导出一条特异蛋白条带.本研究首次克隆了鸭梨PbChiⅢ基因的CDS序列,研究了其在鸭梨不同组织器官中的表达量及在SA诱导下的表达特性,为进一步探索PbChiⅢCDS序列的功能提供了基础资料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许建锋	河北农业大学园艺学院	16	222	9.0	14.0
2	张玉星	河北农业大学园艺学院	105	1012	18.0	26.0
3	彭建营	河北农业大学园艺学院	48	1162	20.0	33.0
4	李朋朋	河北农业大学园艺学院	7	60	4.0	7.0