摘要:
目的 探究孕期镉暴露对小鼠胎盘氨基酸转运系统的影响及其作用机制.方法 选择45只体重相近的孕鼠,于妊娠第7.5天(Embryonic 7.5,E7.5)时,随机(完全随机化法)分为3组,分别喂食0,20mg/L和40mg/L的氯化镉溶液.分别于E13.5天、E16.5天和E19.5天收集各组小鼠的胎盘组织标本和血浆样本,每一妊娠阶段5只动物.通过实时定量PCR技术检测各组小鼠胎盘中L型转运载体-1(L-type amino acid transporter 1,LAT1)、L型转运载体-2(L-type amino acid transporter 2,LAT2)、L型转运载体-3 (L-type amino acid transporter 3,LAT3)、L型转运载体-4(L-type amino acid transporter 4,LAT4)、A型转运载体-1(sodium-coupled neutral amino acid transporter 1,SNAT1)和A型转运载体-2(sodium-coupled neutral amino acid transporter 2,SNAT2)的mRNA表达情况,并对其中差异表达的分子进一步通过蛋白印迹法鉴定其蛋白质水平的变化情况.此外,采用可见光比色法检测各组小鼠血浆中氨基酸的含量.结果 (1)3组孕鼠胎盘中LAT1、LAT2、LAT3、LAT4、SNAT1和SNAT2的mRNA表达水平的比较:3组孕鼠胎盘中的LAT1分子,E19.5天时在40mg/L镉处理组的小鼠胎盘中的mRNA表达水平与正常对照组相比显著性降低,而在E16.5天时无显著性变化.其他5种氨基酸转运载体在不同浓度镉处理组的小鼠胎盘中的mRNA表达水平与正常对照组相比,在E16.5天和E19.5天时均没有显著性变化.(2)3组孕鼠胎盘中LAT1蛋白质表达水平的比较:E16.5天时,与正常对照组相比,不同浓度镉处理组小鼠胎盘中的LAT1蛋白表达水平出现降低,并且40mg/L镉处理组的小鼠胎盘中的LAT1蛋白质表达水平出现显著性变化.E19.5天时,与正常对照组相比,20mg/L和40mg/L镉处理组小鼠胎盘的LAT1蛋白表达水平均明显降低.(3)3组孕鼠血浆中氨基酸含量的比较:E19.5天时,不同浓度镉处理组的小鼠血浆中氨基酸含量与正常对照组相比均出现降低,并且40mg/L镉处理组的小鼠血浆中的氨基酸含量发生显著性变化.E16.5天时,不同浓度镉处理组的小鼠血浆的氨基酸含量与正常对照组相比,均无显著性变化.结论孕期镉暴露引起小鼠胎盘中氨基酸转运载体LAT1的mRNA和蛋白质表达水平和血浆氨基酸含量的显著性降低,这可能是镉致胎儿生长受限的一个重要因素.此外,血浆中氨基酸浓度的降低可能对胎盘中氨基酸转运载体的表达产生抑制作用.