绵羊肺炎支原体多表位融合基因MO-meAg1的构建、表达及重组蛋白免疫原性分析

• 作者: 乔军 刘田莉 卢海亭 孟庆玲 张星星 才学鹏 田路路 贡莎莎 陈创夫 陈诚
• 来源期刊: 西北农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 绵羊肺炎支原体 抗原表位 多表位融合基因 表达
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 678-684
• 页数: 7页
• 分类号: S858.26
• 字数: 5011字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7606/j.issn.1004-1389.2017.05.005

摘要

为获得具有良好免疫原性的绵羊肺炎支原体(MO)重组蛋白,利用ABCpred等软件预测分析MOEF-P、PDHA、P97相似蛋白和EF-Ts蛋白的优势线性抗原表位,构建多表位融合基因MO-meAg1,合成后将其亚克隆至表达载体pET-32a(+),构建原核表达载体pET-32a(+)-MO-meAg1.将pET-32a(+)-MO-meAg1转化至感受态细胞E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达后检测重组蛋白反应原性和免疫原性.SDS-PAGE结果显示,MO-meAg1重组蛋白分子质量约34.5 ku;Western blot分析结果显示,该重组蛋白可被MO阳性血清特异性识别,具有良好的反应原性.小鼠免疫试验结果表明,重组蛋白MO-meAg1具有较强的免疫原性,诱导机体产生的抗血清其间接血凝效价可达1∶128以上.获得的多表位融合蛋白MO-meAg1为绵羊支原体肺炎的免疫学诊断及新型疫苗研究奠定基础.