猪细环病毒数字PCR定量检测方法的建立

• 作者: 周延 夏彪 孙思扬 孙洁 杨春华 祝建新 罗秋红 钟毅
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 猪细环病毒 实时荧光PCR 数字PCR
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 技术支撑
• 页码范围: 80-85
• 页数: 6页
• 分类号: S851.34
• 字数: 4462字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.04.024

摘要

[目的]实现猪细环病毒(TTSuV)的准确定量检测.[方法]根据TTSuV的序列特点,设计特异性引物、探针,建立数字PCR检测技术.对数字PCR反应体系中的引物和探针浓度进行优化,分析方法的灵敏度、特异性,并初步应用于进行临床检测.[结果]最终确定TTSuV1a和TTSuV1b数字PCR反应体系中最佳引物浓度均为250 nmol/L,最佳探针浓度均为300 nmol/L,TTSuV1a型和TTSuV1b型灵敏度均可达到单个拷贝数;以猪圆环病毒Ⅱ型、猪细小病毒和猪伪狂犬病毒进行特异性试验,结果无交叉反应;批内和批间试验表明,该方法的重复性良好;本实验室留存的92份血清样本的检测结果与其背景信息一致.[结论]本研究建立的TTSuV数字PCR法具有特异性强、灵敏度高、检测限低等优点,可用于TTSuV的定量检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨春华		11	80	5.0	8.0
2	钟毅		7	59	4.0	7.0
3	祝建新		21	54	4.0	6.0
4	孙洁		6	10	2.0	2.0
5	罗秋红		3	3	1.0	1.0
6	周延		4	12	2.0	3.0
7	孙思扬		3	12	2.0	3.0
8	夏彪		1	2	1.0	1.0