产肠毒素大肠杆菌STa突变体、LTB和STb融合蛋白在乳酸菌中组成型分泌表达及其免疫原性分析

• 作者: 关乃瑜 夏爽 宋满满 崔文 葛俊伟 谷珊珊 赵鹏 马德星
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 产肠毒素大肠杆菌 mSTa-LTB-STb融合蛋白 乳酸乳球菌 免疫原性
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 免疫学
• 页码范围: 1003-1007
• 页数: 5页
• 分类号: S852.61
• 字数: 3514字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.201702025

摘要

为获得产肠毒素大肠杆菌(ETEC)抗原STa突变体(mSTa)、LTb和STb融合蛋白在乳酸菌表达系统中组成型分泌表达,本研究将mSTa、LTb、STb三价抗原融合基因,克隆于p23启动子-USP45分泌信号肽之后,插入到乳酸乳球菌表达载体pTX8048中,构建了重组表达载体pTX-sls,将其电转化到宿主菌乳酸乳球菌L.lactis NZ9000中进行表达,应用western blot、ELISA方法鉴定蛋白表达情况.将重组乳酸乳球菌pTX-sls/NZ9000口服免疫BALB/c小鼠,分别测定了免疫后不同时间血清中特异性IgG、粪便中特异性的sIgA水平以及血清的中和活性;采用MTT法检测免疫小鼠脾淋巴细胞增殖情况,流式细胞术检测Th细胞免疫类型.结果显示,目的蛋白mSTa-LTB-STb以分泌形式组成型表达,可被阳性血清所识别.在免疫小鼠血清和粪便中均可检测到特异性IgG、sIgA,血清抗体具有一定的中和毒素作用.结果表明,该重组乳酸乳球菌具有作为口服疫苗的潜在应用价值,本研究为研制ETEC乳酸菌活载体口服疫苗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	葛俊伟	东北农业大学动物医学院	74	425	11.0	17.0
2	马德星	东北农业大学动物医学院	30	75	5.0	7.0
3	夏爽	东北农业大学动物医学院	7	23	2.0	4.0
4	崔文	东北农业大学动物医学院	49	148	7.0	9.0
5	赵鹏	东北农业大学动物医学院	4	9	2.0	3.0
6	关乃瑜	东北农业大学动物医学院	3	3	1.0	1.0
7	谷珊珊	东北农业大学动物医学院	5	6	2.0	2.0
8	宋满满	东北农业大学动物医学院	1	1	1.0	1.0