禽网状内皮组织增生症病毒CA蛋白的表达纯化及多克隆抗体制备

• 作者: 姜莉莉 樊兆斌 王立成 陈强
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 禽网状内皮组织增生症病毒 CA 原核表达 抗体
• 年，卷（期）: 2017,（9）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 67-70
• 页数: 4页
• 分类号: S855.3
• 字数: 2918字
• 语种: 中文

摘要

根据禽网状内皮组织增生症病毒(REV) DBYR1102株的前病毒基因组cDNA序列设计并合成1对引物,以pT-G质粒为模板,通过PCR扩增获得该病毒CA基因片段.将其克隆于pET-30a(+)中,构建原核表达质粒pET30a-CA.重组质粒经双酶切和测序鉴定,转化BL21(DE3),经IPTG诱导,SDS-PAGE鉴定蛋白表达情况.利用Ni-NTA His Bind Resin纯化重组蛋白,并经蔗糖浓缩,Western blot法检测重组蛋白的反应原性.纯化后的目的蛋白免疫新西兰白兔,制备兔抗CA多克隆抗体并对其进行鉴定.结果表明构建的重组质粒pET-30a-CA在大肠杆菌BL21中呈可溶性高效表达.经Ni柱纯化和蔗糖浓缩后得到纯度较高的融合蛋白,以纯化的融合蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,抗体效价达1∶25 600.该研究为REV的检测及CA基因的深入研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姜莉莉	锦州医科大学畜牧兽医学院	6	5	1.0	2.0
5	王立成	锦州医科大学畜牧兽医学院	1	1	1.0	1.0
6	陈强	锦州医科大学畜牧兽医学院	1	1	1.0	1.0
7	樊兆斌	锦州医科大学畜牧兽医学院	2	1	1.0	1.0