夹心ELISA定量检测猪圆环病毒2b型抗原方法的建立

• 作者: 乔绪稳 侯继波 张浩明 杨利 郑其升 陈瑾
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪圆环2型病毒 抗原定量 夹心ELISA 纳米抗体
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 诊断和检测技术
• 页码范围: 987-992
• 页数: 6页
• 分类号: S852.65
• 字数: 4497字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.201705008

摘要

为建立快速定量检测猪圆环病毒2b型(PCV2b)抗原含量的方法,本研究采用重组抗PCV2b纳米抗体作为捕获抗体,鼠抗PCV2b单克隆抗体为检测抗体,建立了定量检测PCV2b的夹心ELISA方法.该方法不仅能够用于猪圆环疫苗中PCV2b抗原的检测,还可用于大肠杆菌或杆状病毒表达的PCV2b衣壳蛋白(Cap)亚单位疫苗的检测,且与其它猪病毒无交叉反应.该方法检测细胞培养PCV2b的线性范围是1043 TCID50/mL～1055 TCID50mL,样品回收率为89.3％～105.6％,该方法批内、批间变异系数小于5％,重复性好.该方法与间接免疫荧光方法(IFA)检测相同样品时误差值小于10％,并且ELISA检测结果离散度更小.分别用两种方法定量PCV2b抗原,取相同抗原量免疫猪,其诱导产生的PCV2b抗体效价无显著差异.本研究构建的夹心ELISA方法在定量猪圆环疫苗中PCV2b抗原方面,与传统的IFA方法比较其显示了良好的符合性,并具有更好的重复性和更短的检测周期,是替代IFA方法用于PCV2b定量检测的更优选择.