转基因甜菜品系H7-1的数字PCR定量检测方法

• 作者: 刘二龙 刘津 李婷 高东微
• 来源期刊: 现代食品科技
• 关键词: 转基因甜菜 H7-1品系 数字PCR
• 年，卷（期）: 2017,（7）
• 所属期刊栏目: 食品安全与检测
• 页码范围: 261-269
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2017.7.037

摘要

为实现转基因甜菜品系H7-1的标识管理和精准定量,根据H7-1的5'边界序列和甜菜谷氨酰胺合成酶基因(glutamine synthetase,GS)设计引物和探针建立双重数字PCR检测体系.该方法的特异性、灵敏度、精密度和准确度均进行了测试.结果显示:建立的转基因甜菜H7-1数字PCR检测方法特异于H7-1品系检测,在20 μL反应体中H7-1品系特异性序列和内源基因GS的定量下限(limit of quantitation,LOQ)分别为3.1拷贝/μL和6.3拷贝/μL,检测下限(limit of detection,LOD)检出限分别为0.6拷贝/μL和1.3拷贝/μL,精密度和准确度在可接受范围内,该定量方法不依赖于标准曲线建立,可便捷的应用于转基因甜菜H7-1成分的精确定量检测.