齿垢密螺旋体精氨酸激酶TDE2037的原核表达与纯化

• 作者: 周鹏 唐路 陈宇星 陈文霞
• 来源期刊: 广西医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 齿垢密螺旋体 蛋白纯化 精氨酸激酶
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1686-1690
• 页数: 5页
• 分类号: Q51
• 字数: 3583字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16190/j.cnki.45-1211/r.2017.12.002

摘要

目的:构建齿垢密螺旋体TDE2037基因的原核表达质粒,表达及纯化TDE2037精氨酸激酶蛋白.方法:以齿垢密螺旋体基因组DNA为模板,PCR扩增TDE2037基因,PCR产物经限制性内切酶消化后,由T4 DNA连接酶连接原核表达载体pET-21a以及pET28a-SUMO,连接产物分别转化大肠杆菌BL21 (DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达目的蛋白,采用镍柱亲和层析法纯化目的蛋白,并使用分子排阻预装柱提高蛋白纯度.结果:成功构建TDE2037基因的原核表达质粒,经测序与基因库(Genbank)的TDE2037序列一致,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功诱导表达目的蛋白,融合蛋白由pET-2 1a-TDE2037表达形成包涵体;由pET28a-TDE2037-SUMO表达部分形成包涵体,部分为可溶蛋白.镍柱亲和层析法成功纯化目的蛋白.结论:成功构建齿垢密螺旋体TDE2037基因的原核表达质粒,并表达纯化了重组融合目的蛋白,为下一步研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈文霞	广西医科大学口腔医学院牙体牙髓科	63	236	8.0	12.0
2	唐路	美国阿拉巴马大学伯明翰分校牙学院	12	27	4.0	5.0
4	陈宇星	广西医科大学口腔医学院牙体牙髓科	2	17	1.0	2.0
8	周鹏	美国阿拉巴马大学伯明翰分校牙学院	1	0	0.0	0.0