Sulfolobus acidocaldarius ATCC 33909麦芽寡糖基海藻糖合成酶在Bacillus subtilis中的重组表达和发酵优化

• 作者: 吴敬 宿玲恰 韩唱
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 麦芽寡糖基海藻糖合成酶 枯草芽孢杆菌 重组表达 发酵优化
• 年，卷（期）: 2017,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 162-168
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/J.cnki.biotech.bull.1985.2017-0086

摘要

为实现Sulfolobus acidocaldarius ATCC 33909来源的麦芽寡糖基海藻糖合成酶(MTSase)基因treY在枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)中的重组表达,以质粒pET-24a(+)-treY为模板PCR扩增得到目的基因,并与表达载体pHY300PLK连接,转入表达宿主Bacillus subtilis CCTCC M 2016536中,重组菌在TB培养基中培养48 h后MTSase酶活达到17.5 U/mL;在此基础上对重组菌发酵条件进行优化,通过单因素实验(氮源种类、氮源复配、氮源浓度、碳源种类、葡萄糖浓度、初始pH、诱导温度)和正交实验(氮源浓度、葡萄糖浓度、初始pH、诱导温度)确定其摇瓶发酵产酶的最适培养基和培养条件为:氮源(工业蛋白胨:棉籽粉=3:1)48.0 g/L、葡萄糖为10.0 g/L、培养基初始pH为7.0,最适培养温度为30℃;在此条件下,MTSase的酶活可达41.5 U/mL,是优化前的2.4倍.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴敬	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室江南大学食品科学与技术国家重点实验室	68	328	7.0	16.0
2	宿玲恰	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室江南大学食品科学与技术国家重点实验室	25	37	4.0	4.0
3	韩唱	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室江南大学食品科学与技术国家重点实验室	1	0	0.0	0.0