鸡MHC Ⅰ分子单链三聚体真核表达载体的构建和表达

• 作者: 侯宏艳 单文杰 周学利 张丹俊 戴银 沈学怀 潘孝成 胡晓苗 赵瑞宏
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡MHC B-F分子 单链三聚体 真核表达
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 139-142
• 页数: 4页
• 分类号: S188+.2
• 字数: 3995字
• 语种: 中文

摘要

[目的]探索主要组织相容性复合体Ⅰ类分子(Major Histocompatibility Complex,MHC Ⅰ)提高抗原呈递效率的方法,获得具有免疫学活性的抗原肽-MHC Ⅰ分子单链三聚体.[方法]采用基因重组技术,通过连接肽(G4S)3将鸡新城疫病毒抗原表位短肽HN(aa346-353)与鸡MHC Ⅰ(B-F)分子二聚体的编码基因共价串联,构建带有绿色荧光标签蛋白的真核表达载体pEGFP-HN346-353-B-Fβ2m-α.[结果]转染真核细胞293T后,荧光显微镜观察可见,重组融合蛋白HN346-353-B-Fβ2m-α分子三聚体主要表达定位于真核细胞的内膜系统.Western Blot结果表明,在预期蛋白分子量大小位置有明显的特异反应带,重组蛋白与其相应抗体可发生特异性结合反应.[结论]重组质粒能够在真核细胞中表达,且融合蛋白具有良好的生物学活性.