双退火温度可增强RT-qPCR过程中的荧光信号

• 作者: 冯德峰 华立栋 周伟平 张亮 陈秋平 高利伟
• 来源期刊: 湖南理工学院学报（自然科学版）
• 关键词: 实时荧光定量PCR 双退火 TanMan探针 水解
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 页码范围: 58-61
• 页数: 4页
• 分类号: Q503
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5298.2018.02.014

摘要

为了比较不同实时荧光定量 PCR 的扩增程序对荧光信号收集的影响, 优化出最佳方案, 并尽可能地成为普适性的实验方法, 以引物及探针为目标, 对其退火温度进行优化, 测试不同的RT-PCR扩增程序, 并以最终的△Fluorescence为依据判断程序优劣. 实验结果表明, 在设定探针的退火温度(62℃)之后,再给定一个较低的引物退火的温度(55℃)有利于荧光信号的收集, 并能得到更为标准的峰形图. 这说明实时荧光定量 PCR 的反应程序中, 设置双退火温度更有利于荧光信号的激发和收集, 更加便于实验结果的判读.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高利伟		11	32	3.0	5.0
2	陈秋平		5	4	1.0	2.0
3	周伟平		4	3	1.0	1.0
4	张亮		7	5	2.0	2.0
5	冯德峰		1	0	0.0	0.0
6	华立栋		1	0	0.0	0.0