新型高产β-胡萝卜素巴斯德毕赤酵母表达宿主菌的构建

• 作者: 孟昆 张祺珮 李雅楠 柏映国 罗会颖 黄火清
• 来源期刊: 中国农业科技导报
• 学科: 生物学
• 关键词: 毕赤酵母 红发夫酵母 β-胡萝卜素 甘露聚糖酶
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 生物技术 生命科学
• 页码范围: 48-55
• 页数: 8页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.13304/j.nykjdb.2017.0116

摘要

分泌型巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)作为高效表达宿主菌已被广泛应用,通过高密度培养工艺用于多种酶制剂(如植酸酶、甘露聚糖酶等)的规模生产.然而,在生产过程中产生的大量菌体利用率低,多数被废弃掩埋,或只能作为廉价的菌体蛋白,造成大量的资源浪费.为提高酵母发酵副产物的利用率,向毕赤酵母宿主菌GS115中导入来源于红发夫酵母(Xanthophyllomyces dendrorhous)β-胡萝卜素合成途径中的关键基因(idi、crtE、crtYB和crtI),获得了胞内高产β-胡萝卜素的工程菌株P.pastoris GS115-CARO,实现工业生产中的菌体蛋白的高附加值利用.同时以来源于嗜热篮状菌(Talaromyces leycettanus JCM12802)的甘露聚糖酶基因Man5T作为参照,验证了宿主菌P.pastoris GS115和P.pastoris GS115-CARO在表达外源蛋白的差异.结果表明:Man5T基因的导入并没有影响,两株宿主菌的甘露聚糖酶表达量(分别为280 U/mL和286 U/mL,P＞0.05),但宿主菌P.pastoris GS115-CARO胞内β-胡萝卜素产量高达到31.27 mg/g(菌体干重dry cell weight,d.w).构建的工程菌株不仅可以实现外源酶制剂的高效表达,有效地提升酵母菌体资源的利用价值,同时也在一定程度上了解决了发酵菌体对环境的污染问题.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗会颖	中国农业科学院饲料研究所	41	299	11.0	16.0
2	柏映国	中国农业科学院饲料研究所	19	198	9.0	14.0
3	黄火清	中国农业科学院饲料研究所	16	100	6.0	9.0
4	孟昆	中国农业科学院饲料研究所	20	192	9.0	13.0
5	张祺珮	中国农业科学院饲料研究所	1	0	0.0	0.0
6	李雅楠	中国农业科学院饲料研究所	2	1	1.0	1.0