新发猪圆环病毒3型Cap蛋白的原核表达和纯化

• 作者: 周玲玲 宋玉伟 张慢 张明亮 王英杰 连凯琪
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪圆环病毒3型 包涵体 原核表达 蛋白质纯化
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 120-123,129
• 页数: 5页
• 分类号: S855.3
• 字数: 2933字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2018.11.022

摘要

为制备新发猪圆环病毒3型(PCV-3)衣壳蛋白(Cap)的抗原,在大肠杆菌中表达Cap蛋白,并对其进行纯化.通过PCR扩增去除核定位信号区的Cap136-645基因,构建重组表达质粒pET30a(+)-Cap136-645,转化到E.coli BL21(DE3)中进行诱导表达,然后通过SDS-PAGE电泳和Western blot分析进行鉴定,并纯化Cap136-645蛋白.结果表明,成功构建了pET30a(+)-Cap136-645重组表达质粒,且可在E.coli BL21(DE3)感受态细胞中可大量表达,表达的重组蛋白主要以包涵体形式表达,分子质量约为27.5 ku,纯化的蛋白质质量浓度高达1.28 μg/μL,且条带单一.