在体内和体外条件下阿奇霉素通过抑制自噬和上调结肠癌细胞内DR4/5蛋白水平增强TRAIL抗癌活性

• 作者: Shu-zhen Chen Xiaofei Wang Xinran Qiao Yi Li Yue Shang
• 来源期刊: 癌症
• 关键词: 阿奇霉素 TRAIL 凋亡 自噬 结肠癌
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 原创论著
• 页码范围: 545-558
• 页数: 14页
• 字数: 7129字
• 语种: 英文

摘要

背景与目的 阿奇霉素为大环内酯抗生素,曾被报道可抑制肿瘤细胞增殖.然而,其潜在机制尚未完全阐明.肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)选择性地靶向肿瘤细胞而不损伤健康细胞.在本研究中,我们研究阿奇霉素是否与TRAIL协同作用,如果有相互作用,进一步探究其在结肠癌中的潜在机制.方法 对HCT-116、SW480、SW620和DiFi细胞进行阿奇霉素给药处理,纯化TRAIL或它们的结合物.采用磺酰罗丹明B实验检测细胞存活.凋亡检测采用了annexin V-FITC/PI染色法,自噬则通过吖啶橙染色法检测.Western blot分析用于检测蛋白表达水平.在机制实验中,siRNA用于敲低死亡受体(DR4、DR5)和LC-3B.利用携带HCT-116异种移植瘤的BALB/c裸鼠进行了阿奇霉素和TRAIL联合抗癌作用的检测.结果 阿奇霉素剂量依赖性地抑制HCT-116和SW480细胞的增殖.阿奇霉素和TRAIL联合抑制肿瘤生长的行为不能通过叠加效应解释.阿奇霉素提高了DR4、DR5、p62和LC-3B蛋白的表达水平,增强了TRAIL诱导凋亡.siRNA敲低DR4和DR5后提高了细胞存活率,降低了阿奇霉素和TRAIL联合诱导的cleaved-PARP的表达.LC-3B siRNA和Chloroquine(CQ)增强了TRAIL单独的抗增殖活性,提高了DR4和DR5的表达.结论 阿奇霉素和TRAIL的协同抗肿瘤作用主要依赖于DR4和DR5的上调,而这是LC-3B相关自噬抑制的结果.