慢病毒介导炭疽毒素受体1基因靶向沉默对γ珠蛋白基因表达的影响

• 作者: 安邦权 徐琴 李贵芳 李頔 熊永红 金婷婷 黄盛文
• 来源期刊: 发育医学电子杂志
• 关键词: β-地中海贫血 炭疽毒素受体1 慢病毒载体 γ珠蛋白
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 213-219
• 页数: 7页
• 字数: 4501字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-5340.2018.04.005

摘要

目的 探讨沉默炭疽毒素受体1 (anthrax toxin receptor 1,ANTXR1)基因对γ珠蛋白基因表达的影响.方法 构建ANTXR1基因特异性序列的shRNA重组质粒及阴性对照重组质粒,经酶切验证及测序鉴定后,将干扰载体和慢病毒质粒共转染入293T细胞后收集病毒上清液,再将其转染至K562细胞中,并经puromycin筛选稳转细胞株.通过实时荧光定量PCR技术检测各组ANTXR1基因和γ珠蛋白基因mRNA的表达情况;通过Western蛋白印迹技术检测各组ANTXR1蛋白和γ珠蛋白的表达情况.采用t检验进行统计分析.结果 获得有效干扰ANTXR1基因的K562稳转细胞株,实时荧光定量PCR结果显示,ANTXR1-shRNA实验组中ATXR1基因和γ珠蛋白基因mRNA相对表达水平分别为0.19±0.02和1.46±0.24;Western蛋白印迹技术结果显示,蛋白相对表达水平分别为0.20±0.01和1.45±0.14.ANTXR1-shRNA实验组与阴性对照组、空质粒载体组和空白对照组相比,ANTXR1基因相对低表达,γ珠蛋白基因相对高表达,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 靶向沉默ANTXR1基因后,促进γ珠蛋白基因mRNA和蛋白水平的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	安邦权	贵州省人民医院检验科	105	480	12.0	16.0
2	李贵芳	贵州省人民医院检验科	50	338	9.0	16.0
3	黄盛文	贵州省人民医院检验科	67	364	9.0	15.0
5	金婷婷	贵州省人民医院检验科	8	29	3.0	5.0
6	徐琴	贵州省人民医院检验科	3	3	1.0	1.0
10	李頔	贵州省人民医院检验科	2	1	1.0	1.0
11	熊永红	贵州省人民医院检验科	2	2	1.0	1.0