SLC22 A12瞬时转染HEK293细胞模型的建立与鉴定

• 作者: 冯瑾 刘亭 刘春花 刘香香 杨友辉 陈雅
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: SLC22A12 HEK293 转染
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 570-574
• 页数: 5页
• 分类号: R692.6
• 字数: 3997字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13705/j.issn.1671-6825.2017.12.109

摘要

目的:构建SLC22A12瞬时转染HEK293细胞模型并进行鉴定.方法:构建GV142-SLC22A12重组质粒,并优化质粒转染人胚肾细胞HEK293的条件.通过qRT-PCR和Western blot检测SLC-HEK293细胞中SLC22A12 mRNA和hURAT1蛋白的表达情况,借助超高效液相色谱-串联质谱法考察尿酸钠摄取能力.结果:HindⅢ和EcoRⅠ双酶切和测序验证显示GV142-SLC22A12质粒构建成功,最佳转染条件为2μg质粒,试剂(μL):质粒(μg)=3:1.与HEK293细胞相比,SLC-HEK293细胞中SLC22A12 mRNA和hURAT1蛋白表达量上调(P<0.001);尿酸钠摄取能力更强(P<0.05).结论:成功建立了SLC22A12瞬时转染HEK293细胞模型.