Bio-PCR方法检测葫芦科作物种子携带西瓜嗜酸菌的特异性引物筛选

• 作者: 云晓敏 李健强 李玉文 罗来鑫 阚玉敏
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: 西瓜嗜酸菌 Bio-PCR 引物 特异性 灵敏度
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 实验方法
• 页码范围: 263-270
• 页数: 8页
• 分类号: S432.42
• 语种: 中文
• DOI: 10.13926/j.cnki.apps.000130

摘要

由西瓜嗜酸菌(Acidovorax citrulli)引起的细菌性果斑病是一种毁灭性的种传病害,可为害多种葫芦科作物并造成重大经济损失.该病原菌为检疫性有害生物,种子带菌是田间病害发生的最重要初侵染来源,因此,种子健康检测成为病害综合防控过程中的重要环节.Bio-PCR是当前种子携带细菌检测的常用方法,而特异性引物的选择和使用是检测的关键.本研究使用已报道的7对引物对17株西瓜嗜酸菌、10株嗜酸菌属其它种的菌株和6株其它属的植物病原细菌进行了Bio-PCR检测,筛选出对西瓜嗜酸菌特异性最好的引物为SEQID4m/SEQID5.研究表明:使用该引物对西瓜嗜酸菌MH21纯菌菌悬液的检测限度为102 CFU·mL-1;在人工添加菌悬液的模拟带菌西瓜种子中,使用ASCM和EBBA两种半选择性培养基结合引物SEQID4m/SEQID5进行Bio-PCR检测,ASCM对种子中带菌量的检测限度可达到0.01 CFU·g-1,EBBA对种子中带菌量的检测限度为0.1 CFU·g-1.