DNMT1基因干扰对猪体细胞克隆胚胎发育、基因转录和DNA甲基化的影响

• 作者: 吴珍芳 李紫聪 石俊松 许卫华
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪体细胞克隆胚胎 DNA甲基转移酶1基因(DNMT1) siRNA 基因转录 DNA甲基化
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 2075-2083
• 页数: 9页
• 分类号: S828
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2018.12.008

摘要

相对于体外受精胚胎,猪(Sus scrofa)体细胞克隆胚胎DNA甲基转移酶1(DNA (cytosine-5)-methyltransferase 1,DNMT1)呈现延迟降解的现象.本研究通过向单细胞期重构胚胎注射抗DNMT1siRNA,记录胚胎卵裂率、囊胚发育率以及囊胚期细胞总数,并提取四细胞期和囊胚期胚胎总RNA和DNA,对发育重要相关基因mRNA水平和DNA甲基化水平进行检测.结果显示,虽然抑制DNMT1未能显著提高猪体细胞克隆胚胎体外发育性能(P＞0.05),但50 μmol/L干扰组囊胚发育率(30.43％)相对于阴性对照组(23.01％)和未注射组(25.74％)有上升的趋势(P=0.19);在基因转录方面,注射抗DNMT1 siRNA显著提高了四细胞期胚胎中POU结构域5类转录因子1(POU domain,class 5,transcription factor 1,POU5F1)基因和囊胚中NANOG基因的表达水平(P＜0.05),也显著上调了囊胚期DNMT1转录水平(P＜0.05);在DNA甲基化方面,注射抗DNMT1 siRNA促进了四细胞期POU5F1基因5'-UTR区域DNA的去甲基化和降低了囊胚期整体甲基化水平;然而DNMT1的过度抑制破坏了非编码RNA H19基因印迹的DNA甲基化状态.本研究表明,温和抑制克隆胚胎中过高的DNMT1 mRNA水平,促进了多能基因的表达和DNA去甲基化重编程,该结果对研究DNMT1在早期胚胎生成过程中的作用机制提供了基础资料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许卫华	龙岩学院生命科学学院	11	42	3.0	6.0
5	李紫聪		1	2	1.0	1.0