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摘要:
目的 提取纯化百日咳鲍特菌(简称百日咳杆菌)脂寡糖(lipo-oligosaccharides,LOS),制备百日咳杆菌多糖蛋白结合物,并分析其理化性质及免疫原性.方法 通过改良热酚水法提取百日咳杆菌的LOS,采用酶解法纯化LOS,通过1%冰醋酸水解获得寡糖(oligosaccharides,OS),产物经Tricine-SDS-PAGE及核磁共振氢谱(1 H NMR)鉴定.OS的羟基经1-氰基-4-二甲氨基吡啶四氟硼酸酯(1-cyano-4-dimethylamino pyridinium tetrafluoroborate,CDAP)活化后,与破伤风类毒素己二酸酰肼衍生物(TTAH)共价结合,制备多糖蛋白结合物,经Sephacryl S-300层析柱纯化后收集结合物原液,并对结合物的理化性质、抗原性进行分析,采用两种剂量(2.5μg/剂和5.0μg/剂)免疫BALB/c小鼠,分析其免疫原性.结果 纯化后LOS纯度>90%,核磁共振结果表明OS结构正确,功能基团得到保留.制备的结合物抗原性未发生改变,经3针免疫后,两种剂量下结合物均有剂次加强效应(P<0.05),且两者差异无统计学意义(P>0.05).结论 将百日咳杆菌OS与TTAH结合是制备百日咳杆菌多糖蛋白结合疫苗的可行途径,并且结合物在小鼠体内具有良好的免疫应答.
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文献信息
篇名 百日咳鲍特菌脂寡糖的制备及寡糖结合物在小鼠体内免疫原性研究
来源期刊 微生物学免疫学进展 学科 医学
关键词 百日咳鲍特菌 脂寡糖 结合物 免疫原性
年,卷(期) 2018,(5) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 21-27
页数 7页 分类号 R378.4+2
字数 5006字 语种 中文
DOI 10.13309/j.cnki.pmi.2018.05.004
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微生物学免疫学进展
双月刊
1005-5673
62-1120/R
大16开
甘肃省兰州市盐场路888号
1973
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