靶向加工番茄elF4E1的CRISPR/Cas9载体有效性验证

• 作者: 付紫梅 向本春 崔百明 袁伦 邵冬南 郝小军
• 来源期刊: 新疆农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 加工番茄 PVY elF4E1 CRISPR/Cas9 瞬时转化
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 页码范围: 230-237
• 页数: 8页
• 分类号: S641.2|S188
• 字数: 5031字
• 语种: 中文
• DOI: 10.6048/j.issn.1001-4330.2018.02.004

摘要

[目的]验证基于CRISPR/Cas9系统构建的靶向编辑加工番茄(Solanum lycopersicum)elF4E1基因载体的有效性,为CRISPR/Cas9系统在培育PVY抗性植株中的应用提供技术支持.[方法]构建靶向编辑番茄真核翻译起始因子elF4E1基因的CRISPR/Cas9系统表达载体,用农杆菌渗透法瞬时转化番茄植株,PCR扩增已转化植株靶位点周围DNA序列后用HaeⅢ进行酶切,回收未切开的条带与pGEM-T载体连接后进行单克隆测序.[结果]对测得的9个克隆序列进行比对分析,在PAM(protospacer adjacent motifs)上游的6～8 bp的碱基处均发生突变,并且都为单碱基的替换,导致多肽链中单个氨基酸的替换.[结论]利用CRISPR/Cas9基因组编辑系统构建的载体能够特异性地靶向加工番茄eIF4E1基因,为利用CRISPR/Cas9系统敲除eIF4E1基因,获得抗PVY病毒的番茄育种材料奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁伦		1	0	0.0	0.0