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摘要:
为了促进亮氨酸脱氢酶在Bacillus subtilis中高效表达,采取在质粒pMA5自带的启动子PHpaⅡ之后分别添加诱导型和组成型启动子,考察双启动子对酶表达的影响.选取2种诱导型启动子(Pgrac、Pgl-M1)和4种组成型启动子(P43、Plaps、PHpaⅡ、PamyQ)进行构建表达,其中组成型启动子PamyQ与PHpaⅡ构成的双启动子效果最好,有效地将胞外活性提高到31.24U/ml,是单启动子PHpaⅡ的3.4倍.在以上最优双启动子的基础上分别融合Sec途径和Tat途径的4种信号肽,但信号肽与双启动子共同作用并没有获得更高的酶活性.选用酶活最高的双启动子突变菌株Bacillus subtilis 168/pW6(PHpaⅡ-PamyQ)进行7.5L发酵罐补料发酵产酶研究,LeuDH酶活达到217.96U/ml,是摇瓶水平的6.97倍,对工业上产亮氨酸脱氢酶有一定参考价值.
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文献信息
篇名 双启动子促进亮氨酸脱氢酶在Bacillus subtilis中表达及发酵研究
来源期刊 中国生物工程杂志 学科 生物学
关键词 亮氨酸脱氢酶 枯草芽孢杆菌 启动子 信号肽 发酵产酶
年,卷(期) 2018,(12) 所属期刊栏目 研究报告
研究方向 页码范围 21-31
页数 11页 分类号 Q78
字数 4646字 语种 中文
DOI 10.13523/j.cb.20181204
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 杨海麟 江南大学工业生物技术教育部重点实验室 104 690 14.0 20.0
2 张玲 江南大学工业生物技术教育部重点实验室 66 239 8.0 12.0
3 王男 江南大学工业生物技术教育部重点实验室 5 4 2.0 2.0
4 金吕华 江南大学工业生物技术教育部重点实验室 2 4 2.0 2.0
5 林荣 江南大学工业生物技术教育部重点实验室 4 4 2.0 2.0
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研究主题发展历程
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亮氨酸脱氢酶
枯草芽孢杆菌
启动子
信号肽
发酵产酶
研究起点
研究来源
研究分支
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引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国生物工程杂志
月刊
1671-8135
11-4816/Q
大16开
北京中关村北四环西路33号
82-13
1976
chi
出版文献量(篇)
4896
总下载数(次)
30
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45351
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