融合表达白细胞介素10与卵清蛋白重组腺病毒口服变应原疫苗的构建及鉴定

• 作者: 关剑 王丹 甄宏楠 谢喜秀 马仕坤
• 来源期刊: 中华临床免疫和变态反应杂志
• 关键词: 白细胞介素10 变应原 重组腺病毒 口服疫苗
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 263-269
• 页数: 7页
• 字数: 4087字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8705.2018.03.002

摘要

目的 构建免疫调节因子白细胞介素(IL)-10与模式变应原卵清蛋白(OVA)融合表达的重组腺病毒载体口服疫苗.方法 直接合成鸡IL-10及OVA的DNA序列后,采用重叠PCR法进行连接.连接序列插入穿梭质粒pHBAd-MCMV的多克隆区,获得重组穿梭质粒pAdIL-10-OVA.经测序鉴定后,pAdlL-10-OVA与腺病毒骨架质粒pHBAd-BHG共转染293细胞,包装获得重组腺病毒AdIL-10-OVA原代病毒,将原代病毒在293细胞中扩增到合适滴度.采用ELISA法检测细胞上清液中融合蛋白的表达水平.结果 重组穿梭质粒插入目标序列经测序鉴定正确,重组腺病毒载体疫苗rAdIL-10-OVA在293细胞中成功表达.结论 成功构建了融合表达IL-10与OVA的重组腺病毒载体疫苗AdIL-10-OVA,为后续动物实验验证其对变态反应性疾病的防治效应奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王丹	中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院妇产科	14	16	3.0	3.0
2	关剑	中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院病理科	1	0	0.0	0.0
3	甄宏楠	中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院放疗科	2	0	0.0	0.0
4	谢喜秀	中国科学院过程工程研究所	2	0	0.0	0.0