针对不同形式猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5重组蛋白的抗体中和活性比较

• 作者: 冯延 夏平安 张改平 张留君 杨国宇 许瑞勤 郭嘉 马思续 魏凤灵
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5 杆状病毒表达系统 真核表达 中和试验
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 1222-1230
• 页数: 9页
• 分类号: S855.3|S852.659.6
• 字数: 6727字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2018.06.014

摘要

GP5蛋白被认为是猪繁殖与呼吸综合征病毒诱导中和抗体的主要蛋白,为探讨GP5蛋白诱导免疫保护的能力,本研究用杆状病毒/昆虫表达系统分别表达了全长和截短的GP5蛋白,同时用大肠杆菌表达系统表达了截短的GP5蛋白.三种重组蛋白经纯化后,免疫小鼠制备抗血清,以PRRSV全病毒作为ELISA包被抗原检测抗血清时,原核表达的截短GP5蛋白抗血清效价为1:200,真核表达的全长GP5蛋白抗血清效价为1:800,真核表达的截短GP5蛋白抗血清效价为1:1 600.将获得的三种抗血清分别在猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macropha-ges,PAMs)进行PRRSV同源(PRRSV VR2332)和异源(PRRSV HeN-3)毒株的血清学中和试验,并通过实时定量PCR方法检测各组中PRRSV mRNA的绝对拷贝数,以抗血清的病毒阻断率≥70％的最大血清稀释度作为该血清的中和效价.结果显示:1)三种重组蛋白的抗血清对两种PRRSV毒株的中和效价均＜1:2,不具有中和活性,部分稀释滴度的血清还增强了病毒的感染;2)抗PRRSV全病毒对照阳性血清对同源毒株的中和效价为1:8,具有中和活性;对异源毒株的中和效价＜1:2,不具有中和活性,同时还产生了 ADE增强作用.上述研究结果提示,GP5的主要中和表位可能更多是构象表位,PRRSV全病毒中主要诱导中和抗体产生的蛋白可能并不完全在GP5蛋白上;PRRSV全病毒阳性抗血清虽然能够提供一定的免疫保护,但这种免疫保护只发生在同源毒株之间,对异源毒株并没有效果,反而会介导ADE效应发生.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏平安	河南农业大学牧医工程学院	65	271	9.0	14.0
2	杨国宇	河南农业大学牧医工程学院	174	1205	16.0	28.0
3	郭嘉	河南农业大学牧医工程学院	7	8	2.0	2.0
4	张留君	河南农业大学牧医工程学院	6	4	1.0	1.0
5	马思续	河南农业大学牧医工程学院	3	2	1.0	1.0
6	魏凤灵	河南农业大学牧医工程学院	2	2	1.0	1.0
7	许瑞勤	河南农业大学牧医工程学院	3	4	2.0	2.0
8	冯延	河南农业大学牧医工程学院	2	2	1.0	1.0