快速简单组织定位甘蔗RSD致病菌Lxx的原位PCR方法

• 作者: 何恩铭 孟红岩 汪文华 胡敏 郭莺
• 来源期刊: 华侨大学学报（自然科学版）
• 关键词: 甘蔗宿根矮化病 革兰氏阳性苛养致病菌 冰冻切片 原位多聚酶链式反应
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 页码范围: 221-226
• 页数: 6页
• 分类号: Q945.8
• 语种: 中文
• DOI: 10.11830/ISSN.1000-5013.201709055

摘要

提出对甘蔗冰冻切片中甘蔗宿根矮化病(RSD)致病菌Lxx(Leisoniaxyli subsp.xyli)进行定位的原位多聚酶链式反应(in situ PCR)方法,为Ixx与甘蔗互作致病机理研究提供有效的实验手段.以染RSD甘蔗品种Badila及其健康株为材料取样制作冰冻切片,切片经溶菌酶消化后,利用病原菌Lxx 16S～23S rDNA内部转录间隔区(ITS)特异性引物进行原位PCR扩增,并对随机参入扩增片段的与地高辛-11-dUTP进行免疫组化,建立甘蔗样品冰冻切片中直接原位PCR方法.结果表明:直接原位PCR对RSD蔗株茎样品切片显色为阳性,阳性信号出现于甘蔗茎部的木质部、韧皮部,而健康蔗株茎样品无信号,方法特异性较好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭莺	华侨大学化工学院	18	63	5.0	6.0
3	孟红岩	福建省亚热带植物研究所福建省生理生化重点实验室	5	15	2.0	3.0
4	汪文华	福建省亚热带植物研究所福建省生理生化重点实验室	4	11	2.0	3.0
5	何恩铭	福建省亚热带植物研究所福建省生理生化重点实验室	8	46	4.0	6.0
6	胡敏	华侨大学化工学院	3	3	1.0	1.0