干扰素诱导蛋白Nmi与人巨细胞病毒皮层蛋白UL23相互作用区域的研究

• 作者: 傅政民 冉艳红 冯琳远 叶倩宸 李弘剑 李晓钿 杨晓苹 陈业伟
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人巨细胞病毒 N-Myc相互作用因子 GST-pulldown实验 免疫共沉淀
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1270-1276
• 页数: 7页
• 分类号: R511|R363
• 字数: 4234字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2018.07.019

摘要

目的:探究干扰素诱导蛋白N-Myc相互作用因子(Nmi)与人巨细胞病毒(HCMV)皮层蛋白UL23相互作用的关键区域.方法:根据前期实验结果,分别将10个不同截短突变型的Nmi构建到原核表达载体pGEX-4T-1上,转化到大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞中,表达并纯化出带有GST标签的融合蛋白,利用GST-pulldown的方法探究Nmi与UL23相互作用的区域.根据GST-Pulldown实验结果,用同源重组的方法在真核表达载体pcD-NA4-Myc上分别构建3个缺失突变型Nmi.将实验组和对照组的Nmi分别与含有Flag标签的UL23质粒共转染至HeLa细胞中,通过免疫共沉淀法进一步研究Nmi与UL23的相互作用区域.结果:(1)10个截短突变型Nmi与GST基因融合的原核表达载体构建成功;(2)3个缺失突变型Nmi与Myc基因融合的真核表达载体构建成功;(3)GST-pulldown实验证明Nmi与UL23相互作用位点位于Nmi上的第192～202位氨基酸区域;(4)免疫共沉淀法确认Nmi的第192～202位氨基酸区域是与UL23相互作用的区域,与GST-pulldown实验结果一致.结论:Nmi与UL23相互作用的区域位于Nmi上第192～202位氨基酸区域.这为阐明UL23帮助HCMV在宿主体内潜伏的分子机理提供了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李弘剑	暨南大学生命科学技术学院	40	186	8.0	11.0
2	冉艳红	暨南大学生命科学技术学院	21	164	7.0	12.0
3	傅政民	暨南大学生命科学技术学院	2	0	0.0	0.0
4	冯琳远	暨南大学生命科学技术学院	2	0	0.0	0.0
5	杨晓苹	暨南大学生命科学技术学院	2	0	0.0	0.0
6	叶倩宸	暨南大学生命科学技术学院	1	0	0.0	0.0
7	陈业伟	暨南大学生命科学技术学院	1	0	0.0	0.0
8	李晓钿	暨南大学生命科学技术学院	1	0	0.0	0.0