上调miR-7对胃癌细胞增殖凋亡的影响及其机制研究

• 作者: 倪钰璇 罗良弢 谭海洋
• 来源期刊: 胃肠病学和肝病学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胃癌 miR-7 细胞增殖 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 论著·胃癌
• 页码范围: 863-868
• 页数: 6页
• 分类号: R735.2
• 字数: 4647字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5709.2018.08.006

摘要

目的 探讨上调miR-7对胃癌细胞增殖凋亡的影响及其可能的作用机制.方法 利用实时定量PCR(qPCR)检测人正常胃黏膜上皮RGM-1细胞和胃癌BGC823细胞中miR-7表达差异;采用脂质体转染法上调BGC823细胞中miR-7表达,并通过qPCR检测其转染效果;CCK-8法检测转染24 h、48 h和72 h后BGC823细胞的增殖情况;转染48 h后,流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡的变化;Western blotting检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖激酶6(CDK6)、细胞周期蛋白依赖激酶4(CDK4)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)蛋白的表达.结果 miR-7在胃癌BGC823细胞中的表达明显低于正常胃黏膜上皮RGM-1细胞(P<0.05).转染miR-7 mimics后,与空白组相比,阴性组中miR-7表达水平无显著差异(P>0.05),干扰组中miR-7表达显著上升(P<0.05).CCK-8检测结果显示,转染24 h、48 h和72 h后,干扰组BGC823细胞中的OD值较空白组显著降低(P<0.05),而阴性组与空白组组间差异无统计学意义(P>0.05).流式细胞仪检测显示,与空白组相比,阴性组中G1期、S期、G2/M期细胞所占比例和细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05),而干扰组中G1期细胞所占比例和细胞凋亡率显著升高,S期和G2/M期细胞所占比例显著下降,差异均有统计学意义(P<0.05).Western blotting检测结果显示,上调miR-7表达后,BGC823细胞中CDK6、CDK4、Cyclin D1和Bcl-2蛋白的相对表达水平均显著下降,Cleaved Caspase-3蛋白表达量显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 上调miR-7可抑制胃癌细胞增殖,促进细胞凋亡,其作用机制可能与上调Cleaved Caspase-3蛋白表达、下调CDK6、CDK4、Cyclin D1和Bcl-2蛋白的表达有关.