棉花精氨酸酶基因GhARG1 cDNA的克隆与表达分析

• 作者: 冯立峰 冯雪 孙艳香 张一名 张瑜 王慧飞 陈光
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 棉花 精氨酸酶 非生物胁迫 信号分子 功能鉴定
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 页码范围: 17-24
• 页数: 8页
• 分类号: Q78|S562.03
• 字数: 6216字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.2018.04.003

摘要

为了深入研究棉花精氨酸酶基因对非生物胁迫的响应以及生理功能,利用电子克隆和RT-PCR技术从棉花中获得了精氨酸酶ORF序列GhARG1,盐渍、PEG6000胁迫及ABA、SA和MeJA处理棉花幼苗,并原核表达棉花精氨酸酶基因.生物信息学分析表明,其ORF序列长度为1023 bp,编码340个氨基酸,具有典型的精氨酸酶保守结构域.qRT-PCR技术分析表明,在叶片中该基因转录水平上受盐渍、PEG6000胁迫及ABA、SA处理的诱导,而对MeJA下调其表达.将GhARG1完整的编码序列融合到原核表达载体pCold-TF中,经过IPTG诱导及SDS-PAGE检测表明,GhARG1编码产物的分子量约为37 ku,与预期相符.pCold-GhARG1重组菌粗酶液中精氨酸酶活性是对照菌的6倍.研究表明,棉花内源性精氨酸酶基因GhARG1可能通过ABA、SA信号途径参与棉花对盐渍和干旱胁迫的响应,且其克隆表达产物具有精氨酸酶活性,为开展其生理功能研究奠定了基础.