棉花ADP-ribosylation factor基因(GhARF1)的克隆与表达分析

• 作者: 侯磊 李家宝 王文锋 罗小英 罗明 肖月华 裴炎
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: ADP核糖基化因子 结构特征 G蛋白 棉花
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1226-1231
• 页数: 6页
• 分类号: S5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0496-3490.2007.08.002

摘要

ADP-ribosylation factor (ARF)是GTP结合蛋白,属于小G蛋白超家族中的ARF亚家族成员,在高尔基体小囊泡形成以及细胞信号传导中起重要作用.棉花纤维的发育需要有高尔基体参与,但ARF基因在棉花纤维发育中的功能尚不清楚.本文利用GHA27作探针,筛选棉花花药的cDNA文库,得到两个序列相同的阳性克隆.核苷酸序列分析表明该基因编码一个有181个氨基酸残基,分子量约20.7 kD的蛋白,与动物、酵母及其他植物的ARF基因有很高的相似性,命名为GhARF1.采用PCR技术获得该基因序列,该基因含有5个外显子和4个内含子.进化树分析表明该基因更接近人类的classⅠ类ARF基因,在编码的氨基酸序列中具有保守的GTP结合区域,即P(GLDAAGKT)、G(NKQD)以及G'(DVGGQ).Northern杂交结果显示GhARF1基因在棉花的纤维、花冠和根中表达量较高,特别是在纤维中的表达量最高,在茎、花蕾中也有表达,而在真叶、子叶和胚珠中的表达较微弱.Southern杂交分析表明,ARF基因在二倍体草棉和四倍体陆地棉基因组中均以多拷贝存在.