小鼠精子发生相关蛋白3基因在小鼠生精细胞的特异表达及对HEK293T细胞凋亡和自噬的影响

• 作者: 曹睿 温丽敏 王海龙 王玉晶 白欣艳 郭睿
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 医学
• 关键词: 精子发生相关蛋白3基因 HEK 293T细胞 细胞转染 自噬 免疫印迹法 小鼠
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 细胞和分子生物学
• 页码范围: 41-48
• 页数: 8页
• 分类号: R321.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2018.01.007

摘要

目的 检测小鼠精子发生相关蛋白3(spata3)基因在小鼠生精细胞的表达情况,并借助过表达细胞模型进一步分析该基因对人胚肾HEK 293T细胞凋亡及自噬的影响,旨在探讨spata3在精子发生过程中的意义.方法 分别采用RT-PCR和免疫印迹法检测spata3基因mRNA及蛋白产物在小鼠各组织中的表达;应用免疫组织化学和免疫荧光染色观察SPATA3蛋白在生精细胞中的定位;借助脂质体将真核表达载体Plv-EGFP-2 (a) purospata3瞬时转染HEK 293T细胞,进一步在蛋白水平分析细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、多聚ADP-核糖聚合酶(PARP)、BAX和Bcl-2及自噬相关蛋白LC3A/B的变化.结果 Spata3基因及其编码产物在小鼠睾丸组织特异表达;粗线期精母细胞和圆形精子细胞的胞质与胞核均有显著SPATA3蛋白的阳性着色,长形精子细胞的胞质也有大量分布;过表达spata3的HEK 293T细胞内活化型Caspase-3和PARP降解产物的含量较对照组差异无显著性,BAX表达量0.815±0.020较裸细胞组0.469±0.012和空载体转染组0.588±0.018均有所增高,Bcl-2含量0.214±0.020低于裸细胞0.507±0.021和空载体转染组0.545±0.024,LC3A/B-Ⅱ的表达量0.741 ±0.037则显著高于裸细胞组0.136±0.011和空载体转染组0.169±0.012.结论 Spata3基因在小鼠生精细胞特异表达,过表达spata3对HEK 293T细胞凋亡无明显影响,但可以促进细胞自噬.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王海龙	山西医科大学寄生虫学教研室	60	295	9.0	14.0
2	郭睿	山西医科大学生物化学与分子生物学教研室	37	117	7.0	8.0
3	曹睿	山西省生物研究所基因药物研究室	6	2	1.0	1.0
4	温丽敏	山西医科大学生物化学与分子生物学教研室	4	12	2.0	3.0
5	白欣艳	山西医科大学生物化学与分子生物学教研室	4	12	2.0	3.0
6	王玉晶	山西医科大学生物化学与分子生物学教研室	3	8	2.0	2.0