乙型肝炎病毒HBx基因的shRNA重组表达载体的构建和鉴定

• 作者: 杜冠魁 桑圣刚 王梦旖 肖曼
• 来源期刊: 中南民族大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 HBx基因 RNA干扰,基因表达
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 民族医药与生物医学科学
• 页码范围: 55-60
• 页数: 6页
• 分类号: Q781
• 字数: 4344字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-4321.2018.04.012

摘要

目的:构建pGenesil-3.1-HBx-shRNA重组表达载体,探讨其作用于HepG2.2.15细胞的生物活性.方法:构建了针对HBx基因的siRNA表达载体,通过电穿孔法转染HepG2.2.15细胞,以荧光显微镜观察细胞的转染效率,QRT-PCR检测细胞中HBx基因的相对表达量,利用CCK-8细胞增殖检测试剂盒检测了细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞凋亡.结果:酶切和测序鉴定证实构建质粒含有HBx基因,QRT-PCR检测和荧光显微镜观察到构建的pGenesil-3.1-HBx-shRNA可以在HepG2.2.15细胞中表达,HBx基因的表达下降了28％(P<0.05),细胞增殖水平下降了47％(P<0.05),质粒pGenesil-3.1-HBx-shRNA转染后的HepG2.2.15细胞凋亡率显著升高.结论:乙型肝炎病毒HBx基因的shRNA重组表达载体构建成功,沉默HBx基因的shRNA能够抑制HBx基因的表达,且对HepG2.2.15细胞的增殖水平起明显的抑制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	桑圣刚	海南医学院基础医学院	31	130	8.0	10.0
2	肖曼	海南医学院基础医学院	27	45	3.0	5.0
3	杜冠魁	海南医学院基础医学院	22	35	3.0	5.0
4	王梦旖	海南医学院基础医学院	1	1	1.0	1.0