靶向整合于MHCC 97-H细胞的HBx基因shRNA表达载体的构建和鉴定

• 作者: 孙会卿 杨旭 王文龙 童明 贺兴鄂 雷建华
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 哲学
• 关键词: RNA干扰 短发夹RNA 乙型肝炎病毒 x基因 MHCC97-H细胞 整合
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 445-447,451
• 页数: 4页
• 分类号: A5126
• 字数: 2575字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0258-4646.2008.04.005

摘要

目的 构建靶向整合于人肝癌MHCC97-H细胞乙型肝炎病毒x基因(HBx gene)基因的shNA真核载体.方法 依据从人肝癌细胞株MHCC97-H中克隆的HBx基因序列,设计合成X169,X220及MOCK(无关对照)3对寡核酸,经退火成互补双链并克隆至pGenesiH载体;经酶切、PCR和测序鉴定;将鉴定的shRNA质粒脂质体转染MHCC97-H细胞,流式细胞分析转染效率.结果 酶切、PCR及测序证实pshRNA-X169/X220/MOCK质粒构建符合设计,转染48 h后MHCC97-H细胞可激发绿色荧光,pshRNA-X220转染效率最低.结论 成功构建靶向整合于人肝癌细胞HBVx基因特异性sRNA表达载体,并成功转染人肝癌细胞株MHCC97-H细胞,为沉默HBx基因实验性肝癌基因治疗奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨旭	中南大学湘雅二医院肝病研究所	80	529	13.0	18.0
2	王文龙	中南大学湘雅二医院肝病研究所	39	162	7.0	11.0
3	贺兴鄂	中南大学湘雅二医院肝病研究所	21	73	5.0	7.0
4	雷建华	中南大学湘雅二医院肝病研究所	28	116	6.0	9.0
5	孙会卿	中南大学湘雅二医院肝病研究所	6	8	2.0	2.0
6	童明	中南大学湘雅二医院肝病研究所	3	3	1.0	1.0