结核分枝杆菌耐药性相关膜蛋白MmpL6的表达与纯化

• 作者: 孙安源 崔克乐 李静
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 外排泵蛋白 原核表达 纯化 亲和层析
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 40-45
• 页数: 6页
• 分类号: R378.91
• 字数: 3838字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2018.01.009

摘要

目的 构建结核分枝杆菌外排泵蛋白MmpL6(Rv1557)表达载体,在大肠杆菌E. coli中诱导MmpL6蛋白高表达并进行纯化.方法 以结核分枝杆菌H37Rv菌株基因组DNA为模板,采用聚合酶链反应扩增目的基因片段,构建pET21b-MmpL6表达载体将表达载体转化至大肠杆菌中,加入异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达,并针对不同表达菌株、温度进行优化,获取最优表达条件.采用Ni-NTA亲和层析以及凝胶过滤色谱纯化目标蛋白.结果 成功构建pET21b-MmpL6重组表达质粒,经 IPTG诱导后,在Rosetta菌株中25 ℃条件下获得最高表达量.结论 成功表达并纯化了 MmpL6蛋白,为该蛋白后续的结构与功能研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李静	安徽医科大学生命科学学院牛物学教研室	37	203	9.0	13.0
2	孙安源	安徽医科大学附属省立医院检验科	6	39	3.0	6.0
3	崔克乐	安徽医科大学附属省立医院检验科	1	2	1.0	1.0