当归MYB4转录因子基因的克隆及表达分析

• 作者: 夏琦 杨彩霞 杨雪 王引权 王振恒 雒军
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 当归 阿魏酸合成 MYB转录因子 基因克隆 表达分析
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 作物栽培·遗传育种
• 页码范围: 48-56
• 页数: 9页
• 分类号: S567
• 字数: 6367字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2018.12.008

摘要

为探索当归(Angelica sinensis)药效成分阿魏酸生物合成中MYB蛋白的结构和功能,从当归中克隆转录因子基因MYB4,并进行序列分析和表达分析.根据MYB4转录因子的DNA保守结构域,结合同源克隆及RACE的原理,运用RT-PCR技术从当归中克隆MYB4基因cDNA的全长序列;利用生物信息学分析工具对该基因编码蛋白质的基本性质、结构特点及生物学功能进行初步预测;应用qRT-PCR分析该基因的表达特征;使用重组技术组装原核表达载体p GEX-4T-3-As MYB4,热击法转化至大肠杆菌BL21(DE3),IPTG(异丙基硫代-β-D-半乳糖苷)诱导重组蛋白表达.结果表明,成功克隆1个MYB4基因,命名为As MYB4,在GenBank中注册,登录号为MG736315;序列分析表明,As MYB4的cDNA全长为1 189 bp,包括804 bp的开放阅读框,编码267个氨基酸,为典型的R2R3-MYB类转录因子家族成员;As MYB4与胡萝卜MYB308的同源性达到93％,且亲缘关系最近.组织特异性表达分析表明,As MYB4基因在当归叶片中的转录水平最高,分别是叶柄、根的1.1、2.0倍;异源表达分析表明,As MYB4蛋白以包涵体形式存在,分子质量为30 ku.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王引权	甘肃中医药大学药学院	51	322	10.0	16.0
2	王振恒	甘肃中医药大学药学院	28	81	5.0	8.0
3	杨雪	甘肃中医药大学药学院	12	5	2.0	2.0
4	夏琦	甘肃中医药大学科研实验中心	17	89	6.0	9.0
5	雒军	甘肃中医药大学科研实验中心	20	40	4.0	5.0
6	杨彩霞	甘肃中医药大学药学院	7	3	1.0	1.0