CRISPR/Cas9定点编辑水稻LOC_Os05g31750基因位点及靶修饰位点遗传稳定性研究

• 作者: 刘莹 却志群 廖锦风 沈春修
• 来源期刊: 核农学报
• 关键词: CRISPR/Cas9 水稻 定点编辑 靶修饰位点
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 植物诱变育种·农业生物技术
• 页码范围: 1041-1049
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2018.06.1041

摘要

为明确CRISPR/Cas9系统中Cas9蛋白的持续剪切是否会导致原已突变的靶位点在水稻代际之间传递时再次产生新的突变,本研究以水稻粳稻品种台北309为转基因受体材料,通过CRISPR/Cas9技术定点编辑了水稻基因位点LOC_Os05g31750,并获得了6株靶位点敲除成功的T0转基因突变体植株,经三代种植收获后,进一步对携带Cas9基因的T1和T2群体进行靶修饰位点PCR扩增测序检测.结果表明,来源于2个T0纯合双等位突变体T0-8和T0-12的所有测试后代群体的靶修饰位点序列都与对应的T0突变体保持一致,进一步证明CRISPR/Cas9基因编辑水稻的靶修饰位点在代际之间可以稳定遗传.本研究结果为利用CRISPR/Cas9基因编辑突变体的遗传后代进行基因功能丧失后的表型分析提供了参考依据.