大黄酸兔源多克隆抗血清的制备与鉴定

• 作者: 孔慧 屈会化 张越 成金俊 熊威 王咏枝 王庆国 罗娟 赵琰 邢洪霞
• 来源期刊: 中国中医药信息杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 大黄酸 人工抗原 碳二亚胺法 兔源多抗血清 酶联免疫分析
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 41-45
• 页数: 5页
• 分类号: R285.5
• 字数: 3867字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-5304.2018.05.010

摘要

目的 合成大黄酸人工抗原,制备敏感性高、特异性强的大黄酸兔源多克隆抗血清.方法 采用碳二亚胺法制备大黄酸人工抗原,将大黄酸分别与牛血清白蛋白和卵清蛋白相偶联.用紫外扫描法鉴定大黄酸人工抗原是否偶联成功,免疫新西兰兔,制备多抗血清,通过间接竞争ELISA测定抗血清效价,通过间接竞争ELISA鉴定抗血清的敏感性和特异性,并分别用间接竞争ELISA和HPLC检测大黄中大黄酸的含量.结果 2只新西兰兔产生的多抗血清效价在1∶64 000以上,其中,2号兔多抗血清敏感性最好,半数抑制浓度为0.09 ng/mL,且具有良好的特异性.兔抗血清测得大黄中大黄酸含量为(0.026±0.001)％,HPLC测得大黄中大黄酸含量为(0.027±0.000)％.结论 本研究制备了敏感性高、特异性强的大黄酸兔源多克隆抗体血清,为建立大黄酸免疫亲和色谱分析技术和快速检测方法奠定了基础.