T-2毒素人工抗原的合成及鼠源多克隆抗血清的制备

• 作者: 孙亚宁 张改平 李文君 李清州 王坤 王方雨 职爱民 胡骁飞 邓瑞广
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: T-2毒素 人工抗原 多抗血清 ELISA
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 158-162
• 页数: 5页
• 分类号: S859.84
• 字数: 3710字
• 语种: 中文

摘要

合成并鉴定T-2毒素人工抗原,通过动物免疫制备敏感性高、特异性好的鼠源T-2毒素多克隆抗血清.采用琥珀酸酐法将T-2毒素活化为T-2HS,T-2HS在碳二亚胺(EDC)作用下与牛血清白蛋白(BSA)或卵清白蛋白(OVA)偶联,合成免疫抗原T-2-BSA和检测抗原T-2-OVA,经鉴定后,分别按30、50 μg/只的剂量免疫BALB/c小鼠,共免疫4次,每次间隔4周,最后1次免疫10 d后,断尾采血,制备多抗血清.利用间接ELISA方法测定抗血清效价,间接竞争ELISA测定其敏感性和特异性.结果表明,免疫的6只小鼠效价均达到了1∶104以上,2号小鼠多抗血清的敏感性最好,其半数抑制质量浓度(IC50)为324 ng/mL,且具有良好的特异性.成功合成了T-2毒素人工抗原,制备了多克隆抗体血清,为T-2毒素单克隆抗体的刺备及其免疫学快速检测方法的建立奠定了基础.