草甘膦人工抗原合成及鼠源多抗血清制备

• 作者: 侯玉泽 姚静静 张改平 王方雨 王晶 王耀 胡骁飞 邓瑞广
• 来源期刊: 核农学报
• 关键词: 草甘膦 人工抗原 多抗血清 ELISA
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 同位素示踪·资源环境·动植物生理
• 页码范围: 194-200
• 语种: 中文
• DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2017.01.0194

摘要

为检测小分子农药草甘膦(PMG)的残留,本研究合成草甘膦[N-(Phosphonomethyl) glycine PMG]人工抗原,通过免疫制备高敏感性、特异性的鼠源PMG多克隆抗血清;采用EDC法将PMG分别与载体蛋白BSA和OVA偶联,合成免疫原PMG-BSA和包被原PMG-OVA;经紫外扫描、SDS-PAGE电泳、质谱鉴定后,免疫BALB/c小鼠,制备多抗血清;利用间接ELISA法测定多抗血清效价,竞争ELISA测定多抗血清的敏感性和特异性.结果表明,所合成的免疫抗原效果较好,免疫的4只小鼠效价均达1:104以上,4号小鼠的多抗血清敏感性最高,半数抑制浓度IC50为31.4 μg·mL-1,与其他有机磷类农药无交叉反应,具备良好的特异性.本试验成功合成了PMG人工抗原,并制得了敏感性高、特异性好的鼠源多抗血清,为PMG单克隆抗体制备及其免疫学快速检测方法的建立奠定了基础.