T-2毒素完全抗原制备及免疫学检测方法的建立

• 作者: 姚静静 孙亚宁 李俊鹏 柴书军 王英华 胡骁飞 邢云瑞 郝慧芳
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: T-2毒素 完全抗原 多克隆抗血清 ELISA
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 124-129
• 页数: 6页
• 分类号: S859.84
• 字数: 3946字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2018.04.023

摘要

为建立小分子霉菌毒素中T-2毒素残留的检测方法,合成并鉴定T-2毒素完全抗原,通过制备敏感性强的抗T-2毒素多抗血清,建立T-2毒素免疫学检测方法.采用N,N'-羰基二咪唑(CDI)法合成完全抗原T-2-BSA和包被原T-2-OVA,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和动物免疫试验对合成的完全抗原进行鉴定,优化ELISA反应条件,建立T-2毒素间接竞争ELISA检测方法.SDS-PAGE结果显示,完全抗原T-2-BSA合成成功;动物试验结果显示,制备的完全抗原能够刺激小鼠产生针对T-2毒素的特异性抗体;基于该抗体所建立的T-2毒素间接竞争ELISA检测方法的灵敏度(IC50)为8.34 ng/mL,检测限(LOD)为0.048 ng/mL.综上,成功合成了完全抗原T-2-BSA,获得了效价高、敏感性强的抗T-2毒素的鼠源多克隆抗体,并初步建立了T-2毒素免疫学检测方法.